什么是营养缺陷型菌株,其选育机理是什么?

一、什么是营养缺陷型菌株,其选育机理是什么?

一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法

①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株。用15W或20W紫外灯管,距离15cm~30cm,照射10sec~20min。在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定。菌悬液要磁力搅拌,使所有单细胞或单孢子均匀受到照射。特别要注意,应在黑暗或红外光下操作,接种后器皿用黑布包严,防止发生可见光的修复作用。

②淘汰野生型

a)抗生素法 某些抗生素能杀死生长繁殖着的微生物,而对处于休止状态的微生物无杀伤作用。如青霉素能抑制细菌细胞壁肽聚糖的生物合成,制霉菌素可损伤真菌细胞膜,二者可分别杀死生长繁殖着的细菌、真菌。

b)菌丝过滤法 适用于放线菌、霉菌等丝状微生物。在基本培养基中野生型孢子能萌发长成菌丝体,而营养缺陷型孢子则不生长。将经诱变处理的孢子接种于液态基本培养基中,振荡培养10h~12h,使原养型萌发(以肉眼刚能看见菌丝为度),然后以滤纸、棉花或玻璃过滤漏斗过滤,菌丝被滤除,未萌发的缺陷型孢子能顺利通过,从而达到富集营养缺陷型的目的。

③检出缺陷型的常用方法

a)逐个测定法(点种法)把经诱变处理并淘汰野生型后的菌液在完全培养基上涂布分离,将培养后长出的每一个菌落分别点种在基本培养基和另一个完全培养基上,凡在基本培养基上不能生长而在完全培养基的相应位置上能生长的菌落,表明其为营养缺陷型。

b)夹层培养法经诱变处理后的菌液,稀释后与基本培养基混匀并倾入平皿中,待凝固后,再加上一薄层不含菌的基本培养基。培养后在皿底将长出的菌落做上标记。然后加上一层完全培养基,再经培养后,新出现的菌落多数是营养缺陷型(图3-31)。此法适用于兼性厌氧的细菌。

C)影印法 将丝绒包在直径小于平皿的圆柱台上,固定,作为影印接种工具,灭菌备用。将经诱变处理并淘汰野生型的菌液涂布于完全培养基表面上,培养,待长出菌落后,用影印接种工具在此平板上轻按一下,然后在另一基本培养基平板上按一下。经培养后在基本培养基上不长而在完全培养基的相应部位上生长的菌落,为营养缺陷型。

④鉴定营养缺陷型——生长谱法 将检出的缺陷型菌株接种在完全培养基上培养,把生长的菌体或孢子洗下,离心清洗后制成浓度为107个/ml~108个/ml的菌悬液。取0.1ml该悬液与基本培养基混匀倒皿,冷凝并稍干燥后,分区加沾有各种营养物的圆滤纸片,培养,观察生长反应。

在筛选营养缺陷型的过程中必须注意表型延迟现象。由于诱变剂一般仅作用于DNA的某一单链,故突变无法反映在当代的表型上,需经DNA复制和细胞分裂后,才使表型发生变异,此即表型延迟现象。

二.富集和分离抗生素敏感菌的营养缺陷型突变株的抗生素法 将抗生素加入原养型培养基(即培养基中缺少营养缺陷型所需的养分)中,能杀死生长中的野生型细胞,而不能生长的突变株得以幸免。

抗生素敏感菌营养缺陷型菌株的筛选过程①菌悬液诱变处理。②死的和活的野生型细胞及一些活的前突变细胞的混合液在C.M.中培养,使已发生营养缺陷突变的细胞的缺陷表型得以充分表现。若无这一阶段的培养,则许多细胞的基因型虽已改变,但表型仍和野生型一样,这些突变细胞在以后接触抗生素时也将被杀死。③在无氮培养液中培养,使营养缺陷型菌株细胞内所含养料尽量消耗,以便停止其生长繁殖。④在含抗生素的M.M.中培养,杀死能生长的野生型菌株。⑤检出缺陷型。⑥鉴定缺陷型.

三.营养缺陷型在科研和生产实践中的应用在科学研究中,营养缺陷型既可作为研究代谢途径和杂交、转化、转导、原生质体融合等遗传规律所必不可少的标记菌种,也可作为氨基酸、维生素或碱基等生物测定的试验菌种。在生产实践中,营养缺陷型可作为菌种杂交、重组育种和构建工程菌时所不可缺少的带有特定基因标记的亲本菌株,它们还常被用作生产核苷酸、氨基酸等代谢产物的生产菌株。由于营养缺陷型在代谢途径中某一步骤发生缺陷,致使终产物不能积累,从而遗传性地解除反馈抑制,使中间代谢产物或另一分支途径的末端产物得以积累。

例如,用高丝氨酸营养缺陷型作为赖氨酸的生产菌株,由于该突变株的遗传性,解除了赖氨酸与苏氨酸的协同反馈抑制,因此,在培养系统中限量补充苏氨酸,就可使天冬氨酸半醛全部向赖氨酸方向转化,赖氨酸产量大大提高。

二、菌株数是指什么?

菌落总数是指在一定条件下(如培养基营养成分、培养基pH、培养温度和时间、菌种的需氧性等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数

三、如何对丝状真菌营养缺陷型进行浓缩?

对丝状真菌营养缺陷型进行浓缩主要考虑抗生素法。

青霉素法(细菌):其基本原理是青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成,因而能杀死生长繁殖的细菌,但不能杀死处于休止状态的细菌。将诱变后的细菌培养在含有青霉素的基本培养基中,可淘汰大部分生长繁殖活跃的野生型细胞,从而达到“浓缩”营养缺陷型细胞的目的。

制霉菌素法(真菌):制霉菌素可与真菌细胞膜上的甾醇作用, 从而引起细胞膜的损伤,因为它只能杀死生长繁殖着的酵母菌或霉菌,所以也可用于淘 汰相应的野生型菌株和“浓缩”营养缺陷型菌株。

菌丝过滤法:适用于丝状生长的真菌或放线菌。其原理是:在基本培养基中,野生型的孢子能 发芽成菌丝,而营养缺陷型的孢子则不能。因此,可将诱变剂处理后的孢子在基本培养 基中培养一段时间后,再用擦镜纸等合适滤纸过滤。重复数次后,就可去除大部分野生 型个体,达到了“浓缩”营养缺陷型的目的。

四、我国科技创新的缺陷是指

我国科技创新的缺陷是指在当前全球科技竞争日益激烈的背景下,中国在科技创新方面仍存在一些显著的缺陷和短板。这些缺陷不仅影响了我国在国际科技舞台上的竞争力,也制约了我国经济和社会的可持续发展。本文将针对我国科技创新的现状以及存在的缺陷进行深入分析,并提出可行的改进建议。

1. 人才短缺

我国科技创新的缺陷是指人才短缺问题是当前我国面临的一个重要挑战。虽然我国在科技领域培养了大量的科研人才,但与发达国家相比,我国的科技人才仍存在数量不足和质量参差不齐的问题。这直接影响了我国科技创新的速度和水平。

2. 知识产权保护不力

在当前的全球化竞争环境下,保护知识产权是保障创新成果的重要手段。然而,我国在知识产权保护方面存在着较大的漏洞和不足。这导致很多科研成果被侵权盗用,严重影响了科研人员的创新积极性。

3. 产学研结合不够紧密

我国科技创新的缺陷是指产学研结合是推动科技创新的重要途径,然而我国在产学研结合方面存在不够紧密的问题。学术界、产业界和政府部门之间的协同机制亟需进一步加强,以促进科研成果的转化和应用。

4. 投入不足

科技创新需要持续的资金投入作为支撑。然而,我国在科技创新领域的投入相较于发达国家还存在一定的差距。投入不足直接影响了科研设施的建设和科研项目的开展,制约了我国科技创新的发展速度。

5. 缺乏原创性研究

在科技创新过程中,原创性研究是关键。然而,我国在一些关键领域缺乏大胆的原创性研究,更多地依赖于模仿和跟随。这导致我国在一些前沿技术领域缺乏核心竞争力。

6. 制度政策不完善

我国科技创新的缺陷是指制度政策是科技创新的重要保障,而我国在科技创新的制度政策上还存在一些不完善之处。缺乏科技创新的长期规划和政策支持,制约了我国科技创新的整体发展。

7. 缺乏国际合作

在全球化的背景下,科技创新已经越来越具有国际性。然而,我国在国际科技合作方面还存在一定的不足,缺乏与国际先进科研机构和企业的紧密合作。这影响了我国科技创新的国际影响力和竞争力。

8. 缺乏创新文化

创新文化是推动科技创新的重要因素之一。然而,我国在创新文化方面仍存在一定的匮乏。缺乏鼓励创新和包容失败的文化氛围,直接制约了科研人员的创新激情和积极性。

改善措施针对以上所述的我国科技创新的缺陷,我们可以采取以下一些改进措施:

  • 加大人才培养力度,提高科技人才的数量和质量。
  • 加强知识产权保护,建立健全的知识产权保护体系。
  • 促进产学研结合,搭建更紧密的产学研合作平台。
  • 增加科技创新投入,提高科技创新的资金支持力度。
  • 鼓励原创性研究,培养和支持原创性科研团队。
  • 完善科技创新政策,建立健全的科技创新制度体系。
  • 加强国际科技合作,积极开展国际技术交流与合作。
  • 倡导创新文化,营造鼓励创新的社会氛围。

通过以上改进措施的实施,相信我国在科技创新领域的短板和不足将逐渐得到弥补,推动我国科技创新水平的不断提升,为当今世界的科技发展做出更大的贡献。

五、基因缺陷是指什么?

所谓基因缺陷是指控制人体某些调节机理的DNA片段或者是碱基对发生丢失或者倒置、重叠,引发了某些疾病发生,如核苷酸的缺失或突变。

六、缺陷管理是指什么?

缺陷管理/软件缺陷管理(Defect Management)是在软件生命周期中识别、管理、沟通任何缺陷的过程(从缺陷的识别到缺陷的解决关闭),确保缺陷被跟踪管理而不丢失。一般的,需要跟踪管理工具来帮助进行缺陷全流程管理 我们团队现在使用的是日事清,日事清日报的基础模版是KPTP,四个部分就组成了一份清晰明了的工作记录,这样的记录既能充分体现你当前的工作状态,又能层次分明地向领导传递工作困难与你的工作能力。此外还可以团队分享、插入图片、语音识别,功能也比较强大。而且切换到月度界面,月度的工作计划就一目了然,画面非常清晰简洁。

七、nifp型人格是缺陷吗?

不一定。不过,infp型人格的形成中,尽管为孩子提供了不错的物质条件和基本正常的情感交流,但父母的角色大多存在一定程度残缺,没能给予孩子饱满恰当的人格尊严和价值,孩子没有安全感也不被理解,总觉得如履薄冰或孤独无力,甚至将自己的价值完全寄托于别人的评价。

infp人格者的父母也许很爱孩子,但他们爱的表达方式大多存在问题,infp人格者也知道自己的父母对自己的爱,但他们有时凌厉苛刻的作风和因种种原因没有给予孩子应有的关注,还在孩子寻求温暖时选择忽视或者冷语相加的行为,都给infp人格者生来敏感又追求美好的心灵增加了阴影,infp人格者会变得更加温和懂事,甚至表面上很自卑,比起父母的爱,印象更深的他们带来的痛。

但痛归痛,不缺爱的infp人格者会理解自己的父母,毕竟他们已经很努力地扮演自己父母角色了,人非圣贤,更何况他们也许也曾受过伤害而无人安慰。

父母的爱,对于infp人格者,只是肥料而非土壤,真正的土壤源于本质的敏感孤傲和善良。以上只是个人理解

八、如何筛选鼠伤寒沙门氏菌的组胺酸缺陷型菌株及其应用举例?

鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的组氨酸营养缺陷型(his-)菌株,在含微量组氨酸的培养基中,除极少数自发回复突变的细胞外,一般只能分裂几次,形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后,大量细胞发生回复突变,自行合成组氨酸,发育成肉眼可见的菌落。某些化学物质需经代谢活化才有致变作用,在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶①,可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。鉴于化学物质的致突变作用与致癌作用之间密切相关,故此法现广泛应用于致癌物的筛选。

编辑本段步骤和方法

  Ames试验的常规方法有斑点试验和平板掺入试验。   1.菌株鉴定 用于测试的菌株,需经基因型和生物学性状鉴定,符合要求才能投入使用。   目前推荐使用的一套菌株是TA97、TA98、TA100和TA102。鉴定前先进行增菌培养。为鉴定结果可靠,需同时培养野生型TV菌株,作为测试菌基因型之对照。增菌培养用牛肉膏蛋白胨液体培养基,接种后于37℃,100r/min振荡培养12h左右,细菌生长相为对数期末,含菌数应为1×109个/ml~2×109个/ml。   鉴定项目:   (1)脂多糖屏障丢失(rfa)用接种环或一端挠起的接种针以无菌操作术取各菌株的增菌培养液,在营养琼脂平板上分别划平行线,然后用灭菌尖头镊夹取灭菌滤纸条,浸湿结晶紫溶液,贴放在平板上与各接种平行线垂直相交。盖好皿盖后倒置于37t温箱,培养24h后观察结果。   (2)R因子 划线接种,贴放滤纸条及培养等均同上,唯滤纸条浸湿的药液不同,为氨苄青霉素钠溶液。TA102除pKM101外,还有pAQ1,载有抗四环素的基因,故另用滤纸条浸湿四环素溶液后贴放于划线接种的平板上。   (3)紫外线损伤修复缺陷(△uvrB)在营养琼脂平板上按上述方法划线接种后,一半接种线用黑玻璃遮盖,另一半暴露于紫外光下8sec,然后盖好皿盖并用黑纸包裹平皿,防止可见光修复作用。培养同上。   (4)自发回变 预先制备底平板;向灭菌并在水浴内保温45℃的上层软琼脂中注入0.1ml菌液;混匀后倾于底平板上并铺平。平皿倒置于37℃温箱培养48h。   (5)回变特性——诊断性试验 上层软琼脂中除菌液外,还注入已知阳性物之溶液,需活化系统者并加入S9mix,余同上。   组氨酸营养缺陷型由自发回变即可知。   2.斑点试验 吸取测试菌增菌培养后的菌液0.1ml,注入融化并保温45℃左右的上层软琼脂中,需S9活化的再加0.3ml-0.4mlS9mix,立即混匀,倾于底平板上,铺平冷凝。用灭菌尖头镊夹灭菌圆滤纸片边缘,纸片浸湿受试物溶液,或直接取固态受试物,贴放于上层培养基的表面。同时做溶剂对照和阳性对照,分别贴放于平板上相应位置。平皿倒置于37℃温箱培养48h。在纸片外围长出密集菌落圈,为阳性;菌落散布,密度与自发回变相似,为阴性。   3.平板掺入试验 将一定量样液和0.1ml测试菌液均加入上层软琼脂中,需代谢活化的再加0.3ml-0.4ml S9mix,混匀后迅速倾于底平板上铺平冷凝。同时做阴性和阳性对照,每种处理做3个平行。试样通常设4个~5个剂量。选择剂量范围开始应大些,有阳性或可疑阳性结果时,再在较窄的剂量范围内确定剂量反应关系。培养同上。同一剂量各皿回变菌落均数与各阴性对照皿自发回变菌落均数之比,为致变比(MR)。MR值≥2,且有剂量-反应关系,背景正常,则判为致突变阳性。

九、什么是钢结构平面型缺陷和体积型缺陷?

平面型缺陷指钢材表面呈直线形的裂纹现象,一般应与锻造或轧制方向一致。主要是因为在加工过程中因表面过烧脱碳,变形和内应力过大以及表面硫,磷杂质含量较多而产生的发纹。裂纹,未融合为面积型缺陷未融合为面积型缺陷。

体积型缺陷是指形状不规则,略显凹陷,底部平坦并有很多密集微孔的斑点的缺陷。形状不规则气孔,夹渣为体积型缺陷。

十、补缺型逆向思维是指

补缺型逆向思维是指

在现代社会中,解决问题的能力变得越来越重要。而逆向思维(Reverse Thinking)作为一种独特的思维方式,为我们提供了一种崭新的解决问题的途径。在逆向思维中,补缺型逆向思维更是一种独特的应用形式。

补缺型逆向思维的含义比较直观,就是通过在问题中找出存在的缺陷或者不足,从而产生新的创意和解决方案。这种思维方式既可以用于个人生活中,也可以应用于商业领域。

补缺型逆向思维在个人生活中的应用

在个人生活中,补缺型逆向思维可以帮助我们解决各种问题。例如,在面对自己的短板时,我们可以通过补缺型逆向思维找到相应的解决方案。以提升自己的英语口语能力为例,我们可以分析自己存在的不足,比如词汇量不够丰富、口语表达能力欠缺等,然后通过学习、练习和参与英语角等方式加以补救。这种思维方式能够帮助我们转变观念,从而提高自己的实际能力。

此外,补缺型逆向思维还可以帮助我们发现生活中存在的问题,并提供新的解决方案。例如,当我们发现家里的收纳不方便时,可以运用补缺型逆向思维,看看有什么地方可以进行改进和完善,例如增加收纳柜、使用可折叠收纳箱等。通过思考问题的不足之处,我们能够找到更好的解决方案,从而提升生活的品质。

补缺型逆向思维在商业领域中的应用

在商业领域中,补缺型逆向思维同样发挥了重要的作用。企业在竞争激烈的市场中,经常需要创新和改进产品或服务,以满足消费者的需求。补缺型逆向思维为企业提供了一种全新的思考方式。

首先,企业可以通过补缺型逆向思维,识别产品或服务中存在的不足之处。比如,某个产品在使用过程中存在不便之处,或者服务环节存在瑕疵等。接着,企业可以运用逆向思维,从用户的角度出发,思考如何解决这些问题。通过精确分析用户需求,改良产品或服务,弥补不足之处,企业能够满足用户的期待,提高竞争力。

此外,补缺型逆向思维还可以帮助企业发掘新的商机和创新点。通过分析市场供需情况,企业可以发现某些领域存在缺陷或者需求被忽视,然后通过补缺型逆向思维找到突破点。这种思维方式不仅能够为企业开拓新的市场,还能够在竞争中获得先机。

总结

补缺型逆向思维作为一种重要的思维方式,能够为个人和企业带来许多益处。在个人生活中,它能够帮助我们发现问题和不足,并提供切实可行的解决方案。在商业领域中,它能够帮助企业提高产品和服务的质量,满足用户需求,并发掘新的商机。

补缺型逆向思维的应用需要我们转变既有的思维习惯,从而能够更好地发现问题和创新。它突破了传统思维的束缚,为问题解决提供了新的视角和思路。